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本文讲的是培养基的配制步骤和ms培养基的相应知识点。希望对你有帮助。别忘了收藏这个网站！

导航：配制培养基的步骤有哪些？操作时需要注意哪些问题？为什么？培养基的制备有几个主要步骤。微生物培养基配置的基本步骤。配制培养基的基本步骤是什么？需要注意什么？配制培养基的步骤？如何准备培养基Q1:准备培养基有哪些步骤？操作时需要注意哪些问题？为什么？1.培养基配方的选择

同一种培养基的配方，在不同的作品中往往会有一些差异。因此，除采用标准方法外，应严格按照其规定进行制备。一般要尽量收集相关资料，比较核对，然后根据自己的使用目的进行选择，并记录其来源。

2.培养基制备记录

每次配制培养基时，应做好记录，包括培养基的名称、配方和来源、各种成分的品牌、最终pH值、消毒温度和时间、配制日期和配制人等。记录应当复制，原始记录应当保存备查。复制的记录应与配制好的培养基一起保存，以防混淆。

3.称量培养基的成分

培养基的各种成分必须准确称量，并应注意防止混淆。最好一次完成，不要中断。配方可以放在边上，每种成分称重并标注在配药边上，待称重的药物一次性收集放在左边，每种成分称重后放在右边。称重完全完成后，还应进行检查。

4.将培养基的成分混合并熔化。

培养基中使用的化学物质应该是化学纯的。使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅，以免培养基中混入微量的铜或铁，使细菌难以生长。最好用不锈钢生菜加热融化。可放入大烧杯或烧瓶中，放入高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽灭菌器中蒸煮融化。当它在锅里融化后，可以用温水加热，随时扰动，防止结焦。如果发现结焦现象，介质不能使用，应重新配制。固体成分大部分熔化后，用小火将所有成分完全熔化，直至沸腾。对于琼脂溶解，用另一部分水溶解其他成分，然后将两种溶液充分混合。在加热和融化的过程中，蒸发损失的水分最终必须得到补充。

5.培养基pH值的初步调节

因为培养基的pH值在加热和消毒的过程中会发生变化，所以在培养基的所有成分完全溶解后，要对PH值进行初步调整。比如牛肉提取物可以降低pH0.2左右，但是肠道提取物的pH会明显升高。因此，对于这一步，操作者要时刻注意摸索经验，以便掌握培养基的最终PH值，保证培养基的质量。调节PH值后，培养基也应煮沸几分钟，以促进培养基中沉淀物的沉淀。

6.过滤并澄清培养基。

液体培养基必须绝对清澈，琼脂培养基也要透明无明显沉淀。因此，应采用过滤或其他澄清方法来满足这一要求。一般液体培养基可以用滤纸过滤，滤纸要折叠成折扇或漏斗状，避免因水压不均造成滤纸破损。

琼脂培养基可以趁热用干净的白色绒布过滤。也可以用双层纱布过滤，中间加一层薄薄的脱脂棉。制作鲜肉、肝、血、土豆等浸液时，一定要先用绒布过滤碎渣，再用滤纸反复过滤。如果过滤法不能满足澄清要求，必须使用蛋清澄清法。也就是说，将冷却到55 ~ 60的培养基置于一个大三角瓶中，装量为

根据使用目的和要求，培养基的分装应在试管、烧瓶和其他合适的容器中。分装量不得超过容器容量的2/3。容器口可以用垫有防潮纸的棉塞塞住，容器外面必须用防水纸包扎(目前试管一般用螺旋盖)。分装时最好使用半自动或电动定量包装机。琼脂斜面培养基分装时，分装量应为能形成2/3底层和1/3斜面的量。包装容器应事先清洗干净并干燥灭菌，以利于培养基的彻底灭菌。每批培养基应单独分装20ml，置于小玻璃瓶中培养，用该批培养基灭菌，以确定该批培养基的最终pH值。

8.培养基的灭菌

通常，培养基可以通过121的高压蒸汽灭菌15分钟。在各种培养基配制方法中，如果没有特殊规定，可采用此方法进行灭菌。

一些耐热成分，如糖类等，应单独配制成20%或更高的浓缩液，用分级灭菌法过滤或消毒，再用无菌技术定量加入培养基中。明胶培养基也应在较低的温度下灭菌。血液、体液、抗生素等。应通过无菌技术提取并加入到冷却至约50的培养基中。

琼脂斜面培养基灭菌后应立即取出，待冷却至55-60时，以适当的斜面放置，直至自然凝固。

9.培养基质量检验

每批培养基配制好后，都要仔细检查一遍。如发现有裂纹、浸水、色泽异常、棉塞被培养基污染等。应该挑出来扔掉。并测量最终的pH值。

将所有培养基放入361培养箱中过夜培养，若有细菌生长则丢弃。

用相关标准菌株接种1~2管或2瓶培养基，培养24~48小时，如出现无菌生长或生长不良。应追查原因并重复接种。如果结果仍与之前相同，则该批培养基应废弃，不能使用。

10.培养基的保存

培养基应保存在阴凉避光的地方，最好放在普通冰箱里。存放时间不得超过一周，倒入的平板培养基不得超过三天。每批培养基必须附有该批培养基制备记录的辅助页或明显的标签。

Q2:培养基的制备有几个主要步骤。培养基制备有四个主要步骤：

1.计算：根据培养基配方比例计算各种成分的用量；

2.称重：精确称量各种配料；

3.融化：将所有配料加入烧杯中，加热，用玻璃棒搅拌溶解，加入琼脂使其融化，然后加水至一定量；

4.调节PH值。

Q3:微生物培养基配置的基本步骤？1.制定配方，确定配置体积，计算待配置体积中各组分的重量。

2.称重。

3.溶解。

4.定容，补充蒸馏水，配制的溶液体积将达到规定的体积。

5.打包。

6.消毒。

7.使用。

注：固体培养基的情况略有不同，分装也有区别。

Q4:配制培养基的基本步骤是什么？需要注意哪些问题？根据公式计算培养基中各种成分的用量称重，(一般移动较快，因为有些成分可能容易吸潮)融化(将称重的成分溶于水。如果是固体培养基，就需要使用凝固剂，如琼脂等。融化时注意搅拌防止糊底)调pH灭菌(高压灭菌)倒盘。

Q5:准备培养基的步骤？1.准备溶液

在容器中加入一部分所需的水，根据培养基的配方称取各种原料，依次加入溶解，最后补足所需的水。对于蛋白胨、肉酱等物质，需要加热溶解。加热过程中蒸发的水应加入wa

趁热用滤纸、纱布或棉花过滤准备好的培养基。用纱布过滤时，最好折叠成六层。用滤纸过滤时，可将滤纸折叠成波纹状，铺在漏斗上进行过滤。

4.包装

过滤后的培养基要分装。如果你想制作斜面培养基，你必须把培养基装进试管里。如果要制作平板培养基或液体或半固体培养基，必须将培养基装在锥形瓶中。

分装时，一只手松开弹簧夹使培养基流出，另一只手拿着几个试管或锥形瓶依次拿起培养基。分装时注意不要让培养基粘在管口或瓶口上，以免浸泡棉球造成杂菌污染。

装入试管的培养基的量取决于试管和锥形瓶的大小和需要。一般制作斜面培养基时，每支15 150mm试管装约3 ~ 4ml (1/4 ~ 1/3管高)。如果制作深层培养基，每支20220毫米试管装约12 ~ 15毫升。每个锥形瓶内装的培养基一般是其体积的一半。

5.添加棉塞

包装后需要用棉塞塞住管口或瓶口。卫生棉条的主要作用是过滤空气，避免污染。棉塞要用普通的鲜干棉，不能用脱脂棉，以免因脱脂棉吸水而无法使用。

制作卫生棉条时，要根据卫生棉条的大小，将棉花摊至合适的厚度，抓一片手掌大小，铺在左手拇指和食指围成的圆孔内，右手食指插入棉花中间，左手食指和拇指稍握，形成一个长的棒状卫生棉条。

棉塞制成后，应迅速塞入管口或瓶口，棉塞应紧贴内壁，不留缝隙，以防空气中的微生物沿折痕侵入。棉塞不能太紧或太松。塞完以后，以手持棉塞、管、瓶不掉落为宜。棉塞的2/3要在管或瓶中，上端露出一点棉花，便于抽取。试管和带棉塞的锥形瓶要用厚纸盖好，用绳子系好，以便灭菌。

6.制作斜面培养基和平面培养基。

培养基灭菌后，如制作斜面培养基和平板培养基，应在培养基凝固前进行。

(1)制作斜面培养基。在实验台上放一块长约0.5 ~ 1m，厚约1cm的木头。将试管的头部放在一根木棒上，使管内培养基自然倾斜，凝固后形成倾斜的培养基。

(2)制作平板培养基。将刚刚灭菌好的装有培养基的锥形瓶和培养皿放在实验台上，点亮酒精灯，右手握住锥形瓶底部，左手拔下棉塞，在酒精灯上轻微灼烧瓶子，左手打开培养皿盖，右手迅速将培养基倒入培养皿中。每盘10 ml左右，盖在盘底。

铺好培养基后，静置15分钟左右。培养基凝固后，叠放5个培养皿，倒置，平放在恒温箱中，24小时后检查。如果培养基不含杂菌，可以用来培养微生物。

参考来源：百度百科-文化传媒

问：如何配置培养基(1)准备母液。按原配方的50 /100或1000倍称取培养基M的必需元素，制成浓缩液。这种浓缩溶液称为母液。配制培养基时，按比例量取母液，稀释至所需浓度。母液配好后，贴上标签。在0 ~ 4的冰箱中使用半年到一年，可以节省很多时间。溶解后可能产生化学反应或沉淀的不能放在同一个容器内。制备母液时，应使用二次蒸馏水。

母液：硫酸镁18.5克，硝酸铵82.5克，硝酸钾95.0克；加水至1000的恒定体积

母液：硼酸620毫克，硫酸锰2230毫克，硫酸锌860毫克，硫酸铜2.5毫克，碘化钾83毫克，钼酸钠25毫克，氯化钴2.5毫克，加水定容至1000毫升，其浓度为100个培养基字母，每加入1升培养基，量取10毫升母液。

母液：5克肌醇，100毫克甘氨酸，25毫克烟酸，25毫克盐酸吡哆醇，5毫克盐酸硫胺素，加水定容至500毫升，其浓度为培养基的100倍，每加入1升培养基，量取10毫升母液。

(2)配制培养基。每1000毫升培养基制备一次。称取琼：脂肪6- 10 g作为凝固剂，按配方要求称取，放入水浴锅中慢慢溶解。首先，在量筒中放入一定量的水，按照母液的顺序和规定量来计量母液。母液结束后，加入吲哚乙酸或萘乙酸、细胞分裂素0.04-10 mg、细胞分裂素等生长调节物质。根据需要每升培养基。加入后倒入融化的琼脂中，每1000 ml培养基中加入30克蔗糖或根据要求测定，定容至所需体积，继续加热至琼脂完全融化。用盐酸或氢氧化钠调节培养基的pH，大多数培养基的pH为5.4 ~ 6.0，MS培养基的pH为5.7。

趁热将准备好的培养基倒入培养容器中。培养基占容器体积的1/4 ~ 1/3。不要把培养基粘在容器壁上，否则容易被杂菌感染。然后及时覆盖，高压灭菌。灭菌应按高压灭菌器的操作规程进行。在121、111 kPa下保持15 ~ 20分钟，严格控制温度和时间。时间过后立即切断电源。

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